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              HBV小鼠

              1. 基本信息

              品系名稱:B6-Tg (HBV)5 Vst /Vst

              常用名C57BL/6-HBV; HBV 轉基因小鼠

              背景C57BL/6NCrl

              毛色黑色


              品系建立

              將1.28倍長度的HBV(A型,GenBank: AF305422.1) 線性化片段注入C57BL/6NCrl小鼠胚胎原核,獲得轉基因陽性小鼠。通過外周血HBV拷貝數分析,保留了拷貝數達到108 IU/ml的首建鼠。按照半合子配野生C57BL/6NCrl小鼠的方式建立了HBV轉基因小鼠品系。


              2. 表型分析

              (1)外周血中人乙肝e抗原,乙肝表面抗原和外周血HBV病毒拷貝數分析表明,雌鼠和雄鼠均有較高水平的表達。

              性別

              數量

              平均值

              體重(g)

              HBeAg(COI)

              HBSAg(COI)

              HBV-DNA(IU/ml)

              70

              17.99

              495.21

              5.80E+04

              5.25E+07

              70

              22.13

              846.61

              1.29E+05

              6.77E+07



              HBV DNA數據散點圖(平均值為5.25E+07)

               5dca2434f29d9.png        

              圖1  5~8周齡HBV小鼠外周血中HBV病毒拷貝數分析。



              ②HBeAg(COI) 數據散點圖(平均值為495.21)

              5dca24484e391.png

              圖2  5~8周齡HBV小鼠外周血中e抗原HBeAg(COI)分析。


              (2)不同月齡HBV小鼠肝臟、脾臟大體觀(Chin Hepatol, 2018, 23(1): 26-30)

              5dca2454474dc.png

              圖3 不同月齡HBV小鼠肝臟、脾臟大體觀。



              (3)不同月齡HBV小鼠肝體比、脾體比,差異不顯著(Chin Hepatol, 2018, 23(1): 26-30)

              5dca246984d19.png

              圖4 不同月齡HBV小鼠肝體比、脾體比。



              (4)采用HBV Tg小鼠和CCL4誘導結合,可以成功建立乙肝肝纖維化小鼠復合模型(參見Acta Lab Anim Sci Sin,2019,27(5))。

                    5dca247d70994.png

              圖5  6種小鼠模型肝組織病理HE、天狼猩紅染色與膠原半定量分析。A. 肝組織病理HE、天狼猩紅染色;B. 膠原染色半定量分析;**P < 0.01 vs WT,▲▲P < 0.01 vs rAAV+CCl4,n = 5。(參見Acta Lab Anim Sci Sin,2019,27(5))。


              研究數據表明HBV Tg 小鼠在聯合CCl4 染毒12 周后能夠穩定成模。合理地選用小鼠慢性乙肝模型可以有效解決HBV 在病毒感染、復制、免疫應答和藥物評價方面的難題。



              3. 應用領域

              高水平表達HBV病毒的小鼠模型,為研究病毒和宿主因素影響HBV復制、發病基因和生理學過程提供了部分可能性;為控制HBV復制研究,提供了穩定可遺傳的小動物模型。

              該模型可用于研究HBV、治療藥物和疫苗及更下游的慢性肝炎和纖維化(結合化學誘導)。



              4. 注意事項

              (1)因為B6背景雄鼠大于6周齡后極容易發生咬架打斗情況,為避免意外發生,建議單只單籠飼養和實驗。若實驗空間緊張,建議選擇雌鼠進行實驗。

              (2)根據衛生部文件《人間傳染的病原微生物名錄》,HBV屬于第三類病毒,需要在ABSL-2(BSL-2)設施進行實驗。

              (3)為了確保安全,建議接種HBV疫苗后,HBV抗體陽性的人員,才能接觸該動物進行實驗和實驗。

              (4)實驗小鼠、排泄物、墊料和相關設施,按照ABSL-2(BSL-2)要求進行處理。



              5. 參考文獻

              (1)LG Guidotti, B Matzke, HSchaller and F V Chisari. J. Virol. 1995, 69(10):6158.

              (2)J. Ren, L.Wang, Z. Chen, et al. Journal of Medical Virology 78:551–560 (2006).

              (3)黃愷, 孫鑫, 趙志敏,等. 兩種乙肝肝纖維化小鼠復合模型的比較[J]. 中國實驗動物學報,2019,27(5).Huang K,Sun X,Zhao ZM, et al. Comparison of two composite mouse models of hepatitis B fibrosis. Acta Lab Anim Sci Sin,2019,27(5).

              (4)孫鑫,黃愷,趙志敏,等. C57BL/6N-Tg(1.28HBV)/Vst 乙肝病毒轉基因小鼠肝臟炎癥與纖維化的病理特點. 肝臟,2018, 23(1): 26-30. Sun X,Huang K,Zhao ZM, et al. Pathological features of liver inflammation and fibrosis in hepatitis B virus transgenic mice C57BL/6N -Tg(1.28HBV) /Vst [J]. Chin Hepatol, 2018, 23(1): 26-30.



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